PCR法，免疫法和pcr法优缺点？
免疫法是基于抗原与抗体结合生成沉淀所建立的分析法。
PCR (Immuno PCR, Im-PCR) 是利用抗原抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性而建立的一种微量抗原检测技术。
PCR优点在于综合了固相免疫反应和PCR两者的特点。因而在保证免疫测定特异性的同时，又具有极高的检测灵敏度。免疫PCR的基本原理与常规标记免疫技术相似，只不过在免疫PCR中所用的抗原或抗体标记物为DNA，在固相免疫结合反应完成后，再采用PCR技术对标记DNA进行扩增，最后通过检测PCR产物对抗原或抗体进行定性或定量分析。
pcr检测 是什么？
荧光RT-PCR检测 是对WHO公布的单重实时荧光RT-PCR检测引物和探针进行重新设计和优化，建立双重荧光RT-PCR反应体系，分别采用羧基荧光素（FAM）和绿色荧光蛋白（VIC）荧光基团标记探针，实现双基因的同时检测。
结果经优化的双重实时荧光RT-PCR 有较好的灵敏度和特异性，对阳性对照质粒检测灵敏度为31拷贝/μl，检测健康和普通发热人员咽拭子以及流感病毒无交叉反应。结论建立了双重实时荧光RT-PCR快速检测 ，提高检测效率和准确度的同时降低了成本，可用于新型冠状病毒的快速应急检测。
什么是PCR熔解曲线法？
PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析，用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物的分析 。原理是在扩增反应完成后，通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产生溶解曲线，随着反应中双链DNA变性，荧光染料又回复到游离状态导致荧光信号降低，用荧光信号改变的负的一次导数与温度作图，在扩增产物的溶解温度上有一特征峰（Tm，DNA双链解链50％的温度），因为它们在不同的温度溶解，所以用这个特征峰就可以将特异产物与其它产物如引物二聚体区分开。我的回答不知道对你是不是有参考作用。
定量PCR为什么要用两步法而不是普通的三步法？
你这个结论并不对。两步法，三步法并没有本质区别，信号的读取都是在每一个延长结束后读取。定量PCR一开始的时候也是三步法的。两步法，是因为设计引物的时候把退火温度设为酶的工作温度，而且定量PCR的产物都很短，需要的时候都短，所以两步法更方便。三步法的话，花的时间长，不利于快速实验。
pcr能检测突变频率吗？
ARMS荧光定量PCR法具有特异性强、灵敏度高、重复性好，可以准确检测到突变频率为1％甚至更低的突变，用时短，只需2小时左右可以完成对样品的检测。
突变扩增系统(arms)又称等位基因特异性扩增法，是一种在聚合酶链式反应(pcr)基础上发展起来用于检测dna中各种点突变的 。
